细胞系描述 | ||
种属:大鼠 组织来源:小肠 生长特性:贴壁生长 形态特征:上皮细胞样 细胞特性:该细胞表达肠上皮特有抗原。氢化可的松可抑制该细胞的生长。 | ||
培养条件: | 完全培养基:DMEM95%(内含2mM Glutamin)+5%胎牛血清+100ug/mlinsulin(细胞生长速度变慢后,血清浓度可加到10%)。 血清我们推荐用: GIBCOFBS-10099-141或HYCLONEFBS-SH30084.03。用质量不好的血清不能保证此细胞会有好的生长状态. 培养条件:37 ℃,CO2:5% | |
传代方法: | 收到细胞后,在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况: 如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,换 10ml新鲜培养液后继续培养。 如果细胞已长满(达80-90%),即可进行传代培养。具体步骤如下: 1. 弃去培养液,用不含钙、镁离子的PBS洗1-2次。 2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,倒转放于37℃培养箱1-3分钟预热,然后将培养瓶翻过来让胰酶与细胞面接触大约10-30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。 3. 按6-8ml/瓶(625px2)补加完全培养基,轻轻打匀后吸出一半,分到新的培养瓶中。如果没有特别说明,收到细胞后的**次传代一般是一传二。 注:1、观察细胞**在低倍镜(4或5X物镜)下进行,否则不能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X或20X物镜下。 2、瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗的新培养基,细胞冻存后,培养基中可不加任何抗生素。 3、有些细胞贴壁不牢,如发现贴壁细胞有脱落,可离心吹打后接种到新瓶内。 4、收到细胞后,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请及时与我们联系。 | |
冻存方法: | 冻存液:90%完全培养液,10%DMSO(细胞培养级),现用现配。 储存:液氮。 |