在实验操作过程中，首先需要确保样本处理的一致性。对于组织样本，建议使用液氮速冻后研磨成匀浆；细菌或细胞样本则需通过离心收集，并用预冷的PBS缓冲液洗涤两次以去除培养基残留。样本裂解建议采用超声波破碎法（冰浴条件下，200W功率，工作3秒间歇5秒，循环10次），该方式能有效释放胞内葡萄糖且避免高温降解。

   标准曲线制备是结果准确性的关键环节。建议将葡萄糖标准品稀释为0、2、4、6、8、10 mmol/L梯度浓度，每个浓度设置3个复孔。特别注意标准品需现配现用，因葡萄糖溶液在室温下易被氧化降解。反应体系加入邻甲苯胺显色剂后，需立即混匀并避光孵育（95℃水浴10分钟），冷却至室温后于630nm波长下测定吸光度。

   数据分析阶段需注意两个常见误差来源：一是样本中可能存在干扰还原糖（如果糖、半乳糖），建议同步测定空白对照孔；二是高浓度样本需适当稀释，使其吸光度值落在标准曲线线性范围内（通常R²≥0.99）。对于细菌发酵实验的动态监测，可每隔2小时取样一次，通过葡萄糖消耗速率评估代谢活性。

   该试剂盒的优化方向可考虑两点：其一，开发96孔板高通量检测方案，适配自动化工作站；其二，尝试将显色反应替换为荧光探针法，提升检测灵敏度（理论检测下限可降至0.1 μmol/L）。这些改进尤其适用于微量样本或单细胞水平的研究需求。

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