大鼠胆固醇(CH)ELISA试剂盒

产品信息

检测范围：0.16~10 μg/mL

灵敏度：0.09 μg/mL

适用样本：血清、血浆、组织匀浆、细胞上清液

保存条件：2–8°C（有效期12个月）

检测原理

双抗体夹心法（Sandwich ELISA）：

预包被板：抗大鼠CH单克隆抗体包被于微孔板。

样本结合：样本中CH与包被抗体结合。

酶标记抗体：加入HRP标记的检测抗体，形成“抗体-CH-酶标抗体”复合物。

显色反应：加入TMB底物，HRP催化显蓝色（终止后变黄色）。

定量分析：450nm波长测OD值，浓度与OD值成正比。

试剂盒组分

| 组分 | 规格 |

| 预包被微孔板 | 12条×8孔 |

| CH标准品 | 6管（冻干粉）|

| 样本稀释液 | 20mL |

| HRP酶标记抗体 | 10mL |

| TMB显色液 | 10mL |

| 终止液 | 10mL |

| 洗涤液（20×浓缩） | 30mL |

| 封板膜/说明书 | 各1份 |

操作步骤

标准品配制：用双蒸水复溶冻干标准品，梯度稀释为0, 0.16, 0.8, 4, 10 μg/mL。

加样：

标准品/样本各50μL加入微孔板，立即加50μL酶标抗体。

37°C避光孵育60分钟。

洗涤：甩去液体，洗涤液注满每孔，静置1分钟后甩干，重复5次。

显色：每孔加TMB溶液90μL，37°C避光显色15分钟。

终止：每孔加50μL终止液（蓝色→黄色）。

检测：450nm酶标仪读取OD值（30分钟内完成）。

结果计算

计算标准孔OD值均值，绘制标准曲线（浓度 vs. OD值）。

将样本OD值代入曲线方程，计算CH浓度。

公式示例：

[ \text{浓度} (\mu g/mL) = \frac{\text{样本OD值} - \text{截距}}{\text{斜率}} ]

注意事项

样本处理：

血清/血浆：离心去除颗粒，避免反复冻融。

组织匀浆：按1:9比例用PBS匀浆后，12000×g离心10分钟取上清。

特异性：与大鼠甘油三酯（TG）、HDL/LDL无交叉反应。

精密度：板内/板间CV均＜10%。

干扰物：避免溶血、脂血或高胆红素样本（可能影响准确性）。
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