大鼠骨胶原交联(Cr)ELISA试剂盒

检测原理

采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）。微孔板预包被纯化抗体形成固相载体，加入样本和标准品后，与标记酶（HRP）的抗体结合形成复合物。TMB底物在过氧化物酶催化下显色（蓝色→黄色），显色深度与样本中Cr浓度呈正相关。通过酶标仪测定450 nm波长下的吸光度（OD值），计算浓度。

试剂盒组分

预包被微孔板（96孔或48孔）

标准品（浓度梯度）

酶结合物（HRP标记抗体）

显色液A/B（TMB溶液）

终止液（2 mol/L硫酸）

洗涤缓冲液（含0.05%吐温20的PBS）

样本稀释液

阴性/阳性对照（质控血清）

操作步骤

样本处理：血清/血浆需离心去除杂质，组织样本需匀浆后离心取上清。

加样：每孔加入标准品或样本100 μL，37℃孵育1小时。

洗涤：弃液后加洗涤液洗板5次。

加酶标抗体：每孔加入HRP标记抗体100 μL，37℃孵育30分钟。

显色：洗涤后加TMB显色液100 μL，避光反应15-30分钟。

终止：加终止液50 μL，15分钟内测定OD值。

技术参数

检测范围：0.5-100 ng/mL（具体以标准曲线为准）

灵敏度：<0.1 ng/mL

精密度：板内变异系数<10%，板间<15%

回收率：80%-120%

保存条件：2-8℃避光保存，有效期6个月

注意事项

仅限科研使用，不可用于临床诊断。

避免反复冻融样本及试剂。

显色时间需严格控制，避免过度反应。

不同批次试剂不可混用。
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