大鼠黑色素细胞抗体(MC Ab)ELISA试剂盒

实验原理

本试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。预先包被抗大鼠MC Ab抗体的微孔板中依次加入样本、标准品及HRP标记的检测抗体，经温育和洗涤后，通过TMB底物显色。显色强度与样本中MC Ab浓度呈正相关，于450 nm波长下测定吸光度（OD值）并计算浓度。

样本处理要求

血清：全血室温静置2小时或4℃过夜，1000×g离心20分钟，取上清；可-20℃或-80℃保存，避免反复冻融。

血浆：使用EDTA或肝素抗凝，采集后30分钟内2-8℃条件下1000×g离心15分钟，取上清检测或冷冻保存。

试剂盒组成

96孔配置：包被微孔板（96T）、标准品（400 ng/ml，0.6 ml）、HRP标记抗体、TMB显色液、终止液、洗涤缓冲液。

48孔配置：半块微孔板（48T）、标准品（0.3 ml）及其他相应组分。

保存条件：未开封试剂2-8℃保存，开封后按说明书要求分装冻存。

操作步骤

加样：每孔加入标准品或样本50 μl，随后加入HRP标记抗体50 μl，37℃温育60分钟。

洗涤：弃液后每孔加洗涤液300 μl，静置30秒后弃去，重复5次。

显色：加入TMB底物100 μl，避光反应15分钟。

终止与检测：加入终止液50 μl，15分钟内测定450 nm OD值。

注意事项

避免反复冻融标准品或样本。

不同批次试剂不可混用，温育时间需严格控制。

若样本浓度超出标准曲线范围，需稀释后重新检测。
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