产品用途

本试剂盒用于定量检测人血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中胆碱乙酰化酶（CHAc）的含量，仅供科研使用，不可用于临床诊断。

实验原理

采用双抗体夹心法：

包被抗体：微孔板预包被高纯度抗人CHAc捕获抗体。

抗原结合：样本中的CHAc与固相抗体结合后，加入HRP标记的检测抗体形成复合物。

显色反应：洗涤后加入TMB底物，在HRP催化下显蓝色，终止液（酸性）作用后转为黄色。

定量分析：450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样本CHAc浓度。

试剂盒组成

| 组分 | 48T规格 | 96T规格 | 保存条件 |

| 酶标包被板 | 1×48孔 | 1×96孔 | 2-8℃ |

| CHAc标准品（640 ng/L） | 0.5ml×1瓶 | 0.5ml×1瓶 | 2-8℃ |

| 标准品稀释液 | 1.5ml×1瓶 | 1.5ml×1瓶 | 2-8℃ |

| HRP标记检测抗体 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃ |

| 显色剂A/B液 | 各3ml×1瓶 | 各6ml×1瓶 | 2-8℃（避光）|

| 终止液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃ |

| 浓缩洗涤液（20×） | 20ml×1瓶 | 20ml×1瓶 | 2-8℃ |

| 封板膜、说明书等 | 按配置提供 | 按配置提供 | — |

注：标准品需用稀释液梯度稀释至320、160、80、40、20 ng/L。

样本处理

血清：全血室温静置10-20分钟，2000-3000 rpm离心20分钟，取上清；若沉淀需再次离心。

血浆：使用EDTA或柠檬酸钠抗凝，离心后取上清。

组织匀浆：按质量体积比1:9加入PBS匀浆，离心后取上清。

操作步骤

加样：设空白孔、标准孔、样本孔，分别加入标准品或样本100μl。

孵育：37℃孵育90分钟，洗板5次。

加酶标抗体：每孔加HRP标记抗体100μl，37℃孵育60分钟，洗板5次。

显色：加TMB A/B液各50μl，37℃避光显色15分钟。

终止：加终止液50μl，15分钟内测OD450值。

注意事项

试剂使用前需平衡至室温，避免反复冻融。

洗涤时需充分拍干，防止交叉污染。

显色时间需严格控制，避免过度反应。

样本中若含沉淀物，需重新离心。

检测范围：10-320 ng/L

有效期：6个月（2-8℃保存）

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