Sanger测序技术一代测序，又称Sanger测序，是由Sanger教授于1975年发明的一种称为链终止法的技术，用来测定DNA序列，这种方法也称做“双脱氧终止法”或是“桑格法”。其核心原理是采用ddNTP取代dNTP，在合成核酸链的过程中

1、克隆PCR产物的最优条件是什么？ 最佳插入片段：载体比需实验确定。1:1（插入片段:载体）常为最佳比，摩尔数比1:8或8:1也行。应测定比值范围。连接用5ul 2X连接液, 50ng质粒DNA,1Weiss单位的T4连接酶，插入片段共

1、PCR产物的电泳检测时间　　一般为48h以内，有些最好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚致消失。 2、假阴性，不出现扩增条带，应该怎么办？　　PCR反应的关键环节有 ① 模板核酸的制备，② 引物的质量与特异性，③ 酶的质量及，

PCR检测微量感染因子时，容易因为污染的而导致各种问题，因此，进行PCR操作时，操作人员应该严格遵守一些操作规程，最大程度地降低可能出现的PCR污染或杜绝污染的出现。 (1)划分操作区：目前，普通PCR尚不能做到单人单管，实现完全闭管操作

什么是PCR实验的灵敏度? 灵敏度指的是PCR扩增反应能够检测到目的基因的最小值。研究结果表明，影响PCR扩增效率的因素，如模板的复杂程度与完整性、引物的纯度及其与模板的结合效率、反应温度、DNA聚合酶的热稳定性与扩增性能、反应缓冲液的离子